ecor1限制酶識別序列的特點是什么

　　EcoRⅠ是從大腸桿菌R菌株中分離出來的第一個限制酶,下面是百分網(wǎng)小編給大家整理的ecor1限制酶識別序列的特點，希望能幫到大家!

　　ecor1限制酶識別序列的特點是什么1

　　EcoRⅠ切割位點：

　　5'-G AATTC-3'

　　3'-CTTAA G-5' 序列，切割位點在G與A之間，形成黏性末端。

　　限制酶的定義

　　限制性核酸內切酶是可以識別特定的核苷酸序列，并在每條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵進行切割的一類酶，簡稱限制酶。根據(jù)限制酶的結構，輔因子的需求切位與作用方式，可將限制酶分為三種類型，分別是第一型(Type I)、第二型(Type II)及第三型(Type III)。Ⅰ型限制性內切酶既能催化宿主DNA的甲基化，又催化非甲基化的DNA的水解;而Ⅱ型限制性內切酶只催化非甲基化的DNA的水解。III型限制性內切酶同時具有修飾及認知切割的作用。

　　限制酶的由來

　　一般是以微生物屬名的第一個字母和種名的前兩個字母組成，第四個字母表示菌株(品系)。例如，從Bacillus amylolique faciens H中提取的限制性內切酶稱為Bam H，在同一品系細菌中得到的識別不同堿基順序的幾種不同特異性的酶，可以編成不同的號，如HindⅡ、HindⅢ，HpaI、HpaⅡ，MboI、MboⅡ等。

　　別名：Endodeoxyribonuclease簡稱限制酶

　　酶反應 限制性內切酶能分裂DNA分子在一限定數(shù)目的專一部位上。它能識別外源DNA并將其降解。

　　單位定義：在指明pH與37℃，在0.05mL反應混合物中，1小時消化1μg的λDNA的酶量為1單位。

　　性狀制品不含非專一的核酸水解酶(由10單位內切酶與1μg λDNA，保溫16小時所得的凝膠電泳圖譜的穩(wěn)定性表示)，這類酶主要是從原核生物中分離出來的，迄今已經從近300多種不同的微生物中分離出約4000種限制酶。

　　限制酶的類型

　　根據(jù)限制酶的結構，輔因子的.需求切位與作用方式，可將限制酶分為三種類型，分別是第一型(Type I)、第二型(Type Ⅱ)及第三型(Type Ⅲ)。

　　第一型限制酶

　　同時具有修飾(modification)及識別切割(restriction)的作用;另有識別(recognize)DNA上特定堿基序列的能力，通常其切割位(cleavage site)距離識別位(recognition site)可達數(shù)千個堿基之遠。例如：EcoB、EcoK。

　　第二型限制酶

　　只具有識別切割的作用，修飾作用由其他酶進行。所識別的位置多為短的回文序列(palindrome sequence);所剪切的堿基序列通常即為所識別的序列。是遺傳工程上，實用性較高的限制酶種類。例如：EcoRI、HindⅢ。

　　第三型限制酶

　　與第一型限制酶類似，同時具有修飾及識別切割的作用。可識別短的不對稱序列，切割位與識別序列約距24-26個堿基對。例如：HinfⅢ。

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　　細菌反擊

　　細菌容易被噬菌體感染，如已經在每月推薦分子中看到的phix174噬菌體。許多細菌用切割外來DNA的方法進行自我保護，如切割感染性噬菌體的DNA。這些細菌產生一種能切割DNA的核酸內切酶，一旦發(fā)現(xiàn)外來DNA便將其切割，因此它們有效地限制了噬菌體對細菌的感染，故這種核酸內切酶被稱為限制酶。

　　分子剪刀

　　每種限制酶特異識別專一DNA序列，并在切割位點將其準確切割。例如，EcoR1切割GAATTC序列，切割位點在G與A之間。細菌將自身的DNA甲基化修飾，防止了被自身核酸內切酶降解。這些甲基化基團被裝到DNA大溝的腺嘌呤或胞嘧啶上（依細菌種類而定），使限制酶不能與DNA序列結合，但又不影響這些DNA序列上遺傳信息的正常識別與表達。噬菌體DNA沒有這些保護性的甲基化基團，所以會被降解。每種細菌都有一種或幾種用來切割特異DNA序列的限制酶，還有與限制酶配對的甲基轉移酶，用來防止限制酶降解細菌基因中的相應序列。

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