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2016醫(yī)學(xué)微生物學(xué)沖刺重點(diǎn):志賀菌屬
志賀菌屬:是人類細(xì)菌性痢疾的病原菌,俗稱痢疾桿菌,人類是其主要宿主,靈長(zhǎng)類動(dòng)物也是其天然宿主。下面是百分網(wǎng)小編分享的一些相關(guān)資料,供大家參考。
一、生物學(xué)性狀
、貵-的短小桿菌,無(wú)芽胞,無(wú)鞭毛,無(wú)芽胞,有菌毛,營(yíng)養(yǎng)要求不高
、诜纸馄咸烟,產(chǎn)酸不產(chǎn)氣,除宋內(nèi)志賀菌個(gè)別遲緩發(fā)酵乳糖(一般3~4天)外,均不發(fā)酵乳糖。在S.S等選擇培養(yǎng)基上呈無(wú)③色半透明菌落。
、軇(dòng)力陰性,引起腸道疾病的無(wú)動(dòng)力細(xì)菌。
、葜举R菌有O和K兩種抗原,O抗原是分類依據(jù),借以將4群和40余血清型(包括亞型)。
A群——痢疾志賀菌(10)
B群——福氏志賀菌(13)→我國(guó)最常見(jiàn)
C群——鮑氏志賀菌(18)
D群——宋內(nèi)志賀菌(1)
二、致病性和免疫性
、逯虏∥镔|(zhì):包括侵襲力和內(nèi)毒素,有的尚能產(chǎn)生外毒素。
、嫠录膊。
、僦举R菌引起細(xì)菌性痢疾。我國(guó)常見(jiàn)的主要是福氏志賀菌(B群)和宋內(nèi)志賀菌(D群)。
、趥魅驹词遣∪撕蛶Ь。傳播途徑主要通過(guò)糞—口途徑。
、壑举R菌傳染幾乎只限于腸道,一般不侵入血液。
、苤举R菌感染有急性和慢性兩種,典型的急性細(xì)菌性痢疾經(jīng)過(guò)1~3天潛伏期后突然發(fā)病,常有發(fā)熱、腹痛、水樣腹瀉,約一天左右,腹瀉次數(shù)增多,并有水樣腹瀉轉(zhuǎn)變?yōu)槟撗ひ罕,伴有里急后重,下腹疼痛等?/p>
、芗毙灾卸拘粤〖渤R(jiàn)于小兒,常無(wú)明顯消化道癥狀而表現(xiàn)為全身中毒癥狀。急性細(xì)菌性痢疾與10%~20%的病人可轉(zhuǎn)變?yōu)槁浴?/p>
、缑庖咝裕嚎垢腥久庖咧饕窍勒衬け砻娴姆置谛訧gA,病后免疫期短暫。
三、微生物檢測(cè)
標(biāo)本采集
盡可能在發(fā)病早期及治療前采集新鮮糞便,選擇膿血便或粘液便,必要時(shí)可用肛拭子采集。
檢驗(yàn)方法及鑒定
生化鑒定
檢查麥康凱瓊脂平板,志賀氏菌的菌落為淺粉紅色,半透明,將此可疑菌落接種于下列培養(yǎng)基中:葡萄糖肉湯,TSI瓊脂斜面,賴氨酸脫羧酶肉湯,動(dòng)力試驗(yàn)瓊脂和胰胨。置35℃培養(yǎng)48h,但應(yīng)在20h進(jìn)行檢查,棄去所有有動(dòng)力、產(chǎn)H2S、產(chǎn)氣、賴氨酸脫羧以及發(fā)酵蔗糖與乳糖的培養(yǎng)物。關(guān)于產(chǎn)生吲哚者,應(yīng)棄去其44℃增菌物中的陽(yáng)性培養(yǎng)物。至于42℃增菌培養(yǎng)中的所有可疑培養(yǎng)物皆有可能是陽(yáng)性或是陰性,因此皆應(yīng)予保留[1] 。
血清凝集法
志賀氏菌有 K和O抗原而無(wú)H抗原。K抗原是自患者新分離的某些菌株的菌體表面抗原,不耐熱,加熱100℃1小時(shí)被破壞。K抗原在血清學(xué)分型上無(wú)意義,但可阻止O抗原與相應(yīng)抗血清的凝集反應(yīng)。根據(jù)志賀氏菌抗原構(gòu)造的不同,可分為四群48個(gè)血清型(包括亞型)。
(1)A群:又稱痢疾志賀氏菌(Sh.dysenteriae),通稱志賀氏痢疾桿菌。不發(fā)酵甘露醇。有12個(gè)血清型,其中8型又分為三個(gè)亞型。
(2)B群:又稱福氏志賀氏菌(Sh.flexneri),通稱福氏痢疾桿菌。發(fā)酵甘露醇。有15個(gè)血清型(含亞型及變種),抗原構(gòu)造復(fù)雜,有群抗原和型抗原。根據(jù)型抗原的不同,分為6型,又根據(jù)群抗原的不同將型分為亞型;X、Y變種沒(méi)有特異性抗原,僅有不同的群抗原。
(3)C群:又稱鮑氏志賀氏菌(Sh.boydii),通稱鮑氏痢疾桿菌。發(fā)酵甘露醇,有18個(gè)血清型,各型間無(wú)交叉反應(yīng)。
(4)D群:又稱宋內(nèi)氏志賀氏菌(Sh.sonnei),通稱宋內(nèi)氏痢疾桿菌。發(fā)酵甘露醇,并遲緩發(fā)酵乳糖,一般需要3~4天。只有一個(gè)血清型。有兩個(gè)變異相,即Ⅰ相和Ⅱ相;Ⅰ相為S型,Ⅱ相為R型。
分離培養(yǎng)
取糞便(粘液或膿血部分)或肛拭標(biāo)本接種GN肉湯增菌,增菌后進(jìn)行分離培養(yǎng)。一般同時(shí)接種強(qiáng)弱選擇性不同的兩個(gè)平板。強(qiáng)選擇鑒別培養(yǎng)基可用沙門、志賀菌選擇培養(yǎng)基(SS);若選擇診斷血清可選擇天津生物芯片福氏志賀式多價(jià)診斷血清可疑菌落進(jìn)行鑒定。
鑒定
挑選可疑菌落3~4個(gè)先用志賀菌屬多價(jià)診斷血清作試探性玻片凝集試驗(yàn)。將試探性凝集試驗(yàn)陽(yáng)性的菌落至少接種2~3支KIA和MIU,經(jīng)35 ℃培養(yǎng)18~24h,凡符合;KIA:K/A、產(chǎn)氣-/+、H2S-;MIU:動(dòng)力-、吲哚+/-、尿酶-,并結(jié)合試探性玻片凝集試驗(yàn)陽(yáng)性結(jié)果可鑒定為志賀菌屬。
核酸擴(kuò)增法
核酸擴(kuò)增技術(shù),即聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(polymerase chainreaction,PCR),其基本原理是設(shè)計(jì)、合成兩條寡核苷酸,作為引物,對(duì)應(yīng)于待測(cè)病原微生物某一段特異性序列的兩端,然后在體外模擬DNA體內(nèi)復(fù)制的過(guò)程反復(fù)擴(kuò)增,使靶序列放大上萬(wàn)倍甚至上百萬(wàn)倍而被檢測(cè)出來(lái)。
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